La traduzione degli appunti di Alain Lafeuillade sulla prima giornata del congresso. In alcuni passaggi possono essere troppo sintetici e sembrare un poco criptici, ma ho preferito non intervenire io con spiegazioni all'interno del testo. Se a qualcuno sembrano poco chiari, chieda pure e proverò a "interpretare".
7 HIV Persistence Workshop: first day
Tenuto per la seconda volta a Miami, Florida, il workshop ha attirato 276 partecipanti da tutto il mondo.
Il workshop è organizzato con il supporto di NIH, NIAID, amfAR e ANRS.
Riguardo alle compagnie farmaceutiche, quest'anno il workshop è stato sostenuto da Gilead, ViiV Healthcare, Bristol-Myers-Squibb e Merck.
La prima giornata è stata dedicata alla presentazione dei risultati dei 3
collaboratories.
Keith Jerome (Seattle, USA) ha presentato DefeatHIV, un collaboratory dedicato alle cellule e all'ingegneria genetica.
Quattro le cose imparate:
- manipolare e riscrivere i genomi dell'ospite e del virus;
- progredire nel trasporto degli enzimi che modificano il DNA;
- creare modelli che aiutino a interpretare i dati;
- usare modelli su primati non umani.
Jerome ha parlato nei dettagli di endonucleasi che hanno una sequenza di riconoscimento che si presenta raramente in un genoma
rare-cutting, in particolare di megaTAL che, come il Cas9, dimostrano di avere la migliore combinazione di attività e specificità.
Le TALEN sembrano troppo tossiche.
La megaTAL chiamata S20 riesce a mutare HIV in modo efficace.
Il vettore usato è l'AAV6.
Il relatore ha concluso dicendo che il modello di primati non umani è quello più adatto e che la ricerca deve procedere oltre la distruzione del CCR5.
David Margolis (Chapel Hill, USA) ha parlato del CARE collaboratory. Il suo obiettivo era portare nuove molecole in fase clinica entro il 2016.
Diversi tipi di molecole sono state testate come sostanze anti-latenza (LRA): inibitori del bromodominio (negli animali), analoghi di Triazol-10, Briologi, Ingenoli ...
Quando la Merck ha esaminato 2.900.000 molecole, ne ha trovate 4.500 che hanno un'attività anti-latenza:
- il 17,4% erano inibitori della farnesil transferasi;
- il 16,1% erano inibitori della HDAC conosciuti;
- altri avevano un meccanismo d'azione sconosciuto.
Il futuro di questo collaboratory è la costruzione di una pipeline di strumenti e modelli per studiare l'eradicazione di HIV.
Il DARE collaboratory è stato descritto da
Steven Deeks (San Francisco, USA).
Hanno provato a rispondere a tre domande:
1. Dove risiede HIV durante la ART?
Gli elite controller di SIV hanno mostrato che i follicoli dei linfociti B sono un reservoir. I linfociti T possono controllare l'SIV al di fuori di essi, ma non all'interno. Una distruzione transitoria dei follicoli dei linfociti B permette ai CTL di diminuire le dimensioni del reservoir.
Negli elite controller di HIV il virus presente nel sangue è di archivio, clonale e arricchito in termini di cellule, mentre il virus nei tessuti si replica attivamente.
Durante la ART, le cellule che contengono SIV DNA nei paraggi dei linfociti T diminuiscono, mentre persistono a livelli stabili nei follicoli dei linfociti B.
Il trattamento durante l'infezione acuta limita la dimensione del reservoir e impedisce la generazione di CTL di escape.
2. In che modo la risposta immune locale dà forma al reservoir?
La risposta infiammatoria durante l'infezione da HIV è rapida, ma la risposta anti-infiammatoria infine prevale, creando un ambiente immunosoppressivo.
La sottoregolazione dei meccanismi immunosoppressivi, in particolare l'IL-10, è ovvia.
La disposizione del collagene / fibrosi linfoide persiste in ogni fase dell'infezione, con la ART e perfino negli elite controller.
I checkpoint immunitari ligandi/recettori sono sovraregolati. Per esempio, l'HIV latente è particolarmente presente in cellule che esprimono la PD-1 e altri checkpoint immunitari.
Uno dei fattori principali che mantengono il reservoir è l'espansione di popolazioni clonali.
3. L'interruzione dei meccanismi che contribuiscono alla soppressione immunitaria cronica permette al sistema immunitario di lavorare meglio?
Di fatto, infiammazione e soppressione immune vanno mano nella mano.
In un caso raccontato ad AIDS 2015 Ipilimumab ha aumentato l'RNA associato alle cellule mentre ha fatto diminuire la viremia residua (riduzione del reservoir).
Pembrolizumab (un anti-PD-1) migliora l'immunità a HIV ex vivo.
Il futuro di questo collaboratory sarà:
- testare il vaccino che usa il CMV come vettore nelle scimmie e negli uomini;
- testare la distruzione dei follicoli con anticorpi anti-CD20 nelle scimmie;
- testare il blocco dei checkpoint immunitari nelle scimmie e in esseri umani con cancro;
- testare l'immunomodulazione (mTOR, ACTG).
La seconda parte di questa sessione è stata una tavola rotonda (le sfide trasversali nella ricerca di una cura), in cui sono state trattate 3 questioni:
1. Partnership con l'industria e superamento delle barriere alla ricerca traslazionale.
Gilead e Merck sono completamente coinvolte nella ricerca di una cura.
Una barriera potrebbe essere la mancanza di strumenti efficienti per misurare i reservoir e i risultati degli interventi terapeutici.
Un'altra barriera è data dal fatto che le società non sempre sono disposte a mettere a disposizione i loro farmaci, se questi sono (o saranno) approvati in altri campi per cercare di proteggerli.
2. Gli ARV e l'ottimizzazione di modelli animali per la valutazione di strategie di cura.
Secondo Janice Clements, il prezzo dei farmaci può essere un ostacolo (ad esempio il Darunavir).
Dobbiamo tener conto che vengono usati ceppi diversi.
Dobbiamo considerare con attenzione la questione che affrontiamo e scegliere il ceppo più adatto (per esempio, un ceppo macrofago-tropico per studiare il cervello).
Dobbiamo tener conto di quando la ART è iniziata dopo l'infezione nei modelli animali, qual è la diversità virale in quel momento e la durata degli ARV.
Il modello dei topi umanizzati ha dei limiti:
- i topi sono piccoli;
- è un modello di infezione da HIV accelerato rispetto a quello umano (ma questo può anche essere un vantaggio);
- in alcuni topi si verifica un certo grado di Graft versus Host.
Infine, i modelli di NHP e quelli di topi umanizzati sembrano entrambi interessanti.
3. L'impostazione dei trial clinici: popolazioni e end point appropriati negli studi di controllo rispetto a quelli di eradicazione.
Contrariamente a quanto in genere si pensa, la terapia genica potrebbe essere scalabile in futuro grazie ai progressi della tecnologia.
È stata sollevata una questione importante: dobbiamo testare interventi di "cura" in persone con infezione acuta (in cui il reservoir è così piccolo che non siamo capaci di misurarlo), oppure in pazienti con infezione cronica (in cui il sistema immunitario è compromesso)? Tuttavia, si possono studiare entrambe le popolazioni e poi stratificare i risultati.
La conferenza di apertura è stata tenuta da
Carl Dieffenbach, Direttore del NIAID.
Carl Dieffenbach è alla Division of AIDS da 25 anni.
La sua conferenza è stata sulla agenda di una cura dell'HIV del NIAID.
Anzitutto, ha sottolineato che la cura deve essere semplice, sicura e scalabile.
La sua lezione è stata divisa in 3 sezioni:
1. La formazione del reservoir di HIV. Ha descritto l'evoluzione della bimba del Mississippi e chiesto quali siano i passi e i momenti critici delle 24-48 ore dopo la nascita riguardo allo stabilirsi del reservoir e alla risposta immune a HIV.
Ha presentato 2 studi:
Lo studio IMPAACT P1115, che sperimenta una terapia antiretrovirale molto precoce e intensiva nei bambini con HIV.
Lo studio TIES, che tratta i neonati entro 24-48 ore dalla nascita.
2. La caratterizzazione del reservoir. Ha sottolineato il fatto che esistono reservoir anatomici come i follicoli dei linfociti B da cui i CTL sono esclusi.
"Il tessuto è la questione [
si perde il gioco di parole: the tissue is the issue], ha detto Carl Dieffenbach, noi prendiamo campioni di sangue solo per comodità".
3. I nuovi interventi e le possibilità di ricerca. Carl Dieffenbach ha detto che dovremmo avere sostanze che riescano insieme a sopprimere la replicazione del virus e a promuovere l'uccisione delle cellule infette in tutti i siti di replicazione nuova e attiva.
Ha elencato una grande varietà di strade possibili:
- Strategie genetiche, comprese Zinc Finger Nucleases e CRISPR/Cas9.
- Strategie dirette allo stato di attivazione della cellula: ma questi metodi di attivazione non finiscono semplicemente con il propagare il reservoir?
- Metodi per mettere definitivamente il provirus a dormire: trascritti antisenso, complessi polycomb.
- Anticorpi monoclonali.
- DART che dirigono la citolisi mediata dai linfociti T verso le cellule latentemente infette.
- Tecnologia del recettore antigenico chimerico (CAR).
- Vaccini terapeutici: ma ad oggi non hanno dimostrato alcuna reale attività, a parte quello che usa come vettore il CMV.
- Combinazione di immunoterapia con ART.
